Algunos elementos para estudiar los cortes histológicos

En la entrada anterior presentábamos las imágenes microscópicas de la carne de los pimientos y alegría riojana. Para interpretar adecuadamente los cortes es necesario tener en cuenta algunos conceptos referentes a la estructura histológica del fruto del pimiento. De Weryszko-Chmielewska y Michalojć (2011) hemos tomado esta imagen con las capas del pericarpo del pimiento (la carne que hemos analizado bioquímicamente).

 

La epidermis está formada por una sola capa de células con una gruesa pared celular, principalmente en la cara externa. 

Por debajo aparece una capa de colénquima; es un tejido formado por células vivas, con las paredes muy engrosadas. Presentan forma alargada y una pared celular muy gruesa que las diferencia de las células parenquimáticas, las situadas más al interior del fruto. Una característica importante del colénquima es que sus célula presentan engrosamientos distribuidos de modo desigual, lo que hace que el tejido sea muy resistente al estrés mecánico. Se puede encontrar una información más detallada en la página web de M. Megías, de la Universidad de Vigo (https://mmegias.webs.uvigo.es/). De esta página es la imagen que se muestra abajo sobre los tipos de célula colenquimáticas:

Tipos de colénquima atendiendo a la morfología de las paredes celulares. Tomado de https://mmegias.webs.uvigo.es/1-vegetal/guiada_v_sosten.php#colenquima

Por último, la capa inferior está constituida por parénquima. Las células parenquimáticas son células vivas, con una pared celular, en general poco engrosada. Presentan formas muy variadas, dependiendo de la función que desempeñan. Pueden dejar espacios intercelulares que forman espacios que facilitan el intercambio de gases.

Las imágenes de los cortes de los pimientos frescos de los que disponemos se muestran a continuación:

 

 

 

A: pimiento california green nuevo. B: pimiento alegría riojana verde nuevo. C: pimiento alegría riojana rojo joven. Todas las imágenes a 40X.

Comparación de pimientos alegría riojana verde nuevo (izda) y viejo (dcha).

Imágenes microscópicas de nuestros pimientos

Una vez concluida la parte experimental referida al análisis bioquímico de nuestros pimientos es ahora momento de ir adentrándonos en el análisis histológico. Justo antes de irnos de vacaciones procedimos a preparar nuestros primeros bloques de tejido de pimiento incluido en parafina. Esta mañana el doctor Juan de Dios Alché, el otro investigador responsable del proyecto, me ha dado una colección de cortes histológicos de distintas partes de los pimientos y de las distintas variedades con las que estamos trabajando. También nos han dado imágenes de los mismos. La imagen de abajo muestra una composición con algunos de estos cortes; concretamente estos son de carne de pimiento, donde hemos hecho las determinaciones bioquímicas. Pero también tenemos de la placenta y de las semillas.

Por lo pronto, comencemos analizando las imágenes de abajo. Todas están observadas a 10 aumentos. ¿Vemos alguna diferencia en los cortes de los distintos tipos de pimientos, bien dentro de la misma variedad, según su estado de maduración, o entre distintas variedades?

Resultados de las determinaciones bioquímicas de pimientos Alegría riojana secos

 Esta mañana hemos procedido a hacer las determinaciones bioquímicas a partir de los pimientos secos. Dichos frutos se rehidrataron el pasado miércoles añadiéndoles la cantidad de agua que pierden por desecación (su peso seco es de un 16% del total) y se mantenido durante 48 horas en el frigorífico. Después se ha procedido a preparar extractos con la misma metodología que con los pimientos de experimentos anteriores.

Es importante hacer constar que la dilución que se ha tenido que hacer para llevar a cabo una lectura fiable en el espectrofotómetro de los pigmentos ha sido 1/16. Recordemos que hemos preparado 0,5g de pimientos rehidratados en 10 ml de etanol 96º.

Los resultados se muestran en la siguiente tabla.

Es ahora momento de comparar con los resultados anteriores y de hacer, aunque no tengamos datos para pimientos frescos de esta variedad, una valoración de cómo afecta la desecación al contenido nutritivo del pimiento.

Preparamos los pimientos de la variedad alegría riojana roja para las pruebas bioquímicas

El paso siguiente de nuestro proyecto va a ser estudiar los parámetros bioquímicos habituales en la variedad picante de pimientos. En este caso vamos a partir de material vegetal seco, por lo que habrá que proceder a rehidratarlo. Puesto que el peso seco de estos pimientos es un 16% del peso fresco, hemos troceado la carne y a 6,4 gramos de fruto le hemos añadido 33,6 ml de agua. Lo hemos introducido todo en un tubo falcon y hemos dejado en el frigorífico hasta el próximo viernes que haremos los experimentos. En las fotos se puede ver a Hugo e Iván, preparados con gafas de protección y guantes dado el alto contenido en capsaicina de esta variedad de pimientos.