Esta mañana hemos procedido a hacer las determinaciones bioquímicas a partir de los pimientos secos. Dichos frutos se rehidrataron el pasado miércoles añadiéndoles la cantidad de agua que pierden por desecación (su peso seco es de un 16% del total) y se mantenido durante 48 horas en el frigorífico. Después se ha procedido a preparar extractos con la misma metodología que con los pimientos de experimentos anteriores.
Es importante hacer constar que la dilución que se ha tenido que hacer para llevar a cabo una lectura fiable en el espectrofotómetro de los pigmentos ha sido 1/16. Recordemos que hemos preparado 0,5g de pimientos rehidratados en 10 ml de etanol 96º.
Los resultados se muestran en la siguiente tabla.
Es ahora momento de comparar con los resultados anteriores y de hacer, aunque no tengamos datos para pimientos frescos de esta variedad, una valoración de cómo afecta la desecación al contenido nutritivo del pimiento.
En cuanto a los niveles de pH y de Brix, la variedad melchor roja y la alegría riojana tienen valores prácticamente iguales. Esto se puede deber a que ambos se encuentran en un momento de maduración semejante cuando son retirados de la planta.
ResponderEliminarSin embargo, la alegría riojana ha mostrado unos valores mucho más bajos de vitamina C, 1,36 micromoles/mL frente a los 5 micromoles/mL de los pimientos rojos.
El contenido proteico de la alegría riojana es muy parecido al de los pimientos verdes y la valoración de los pigmentos es similar a la de los pimientos rojos. Es decir, no obtenemos valores para las clorofilas, ya que los cloroplastos se han degradado, y los valores de los carotenos son bastante altos, aunque más bajos que en los pimientos rojos.
En conclusión, la alegría riojana es similar al pimiento rojo Melchor a excepción del contenido proteico y de la vitamina C.
Un saludo.
En la sesión de hoy trabajaremos con la variedad de pimiento Alegría Riojana (picante). Esta variedad es rica en capsaicina, sobre todo en las semillas. Estos se encuentran secos por lo cual había que entrar un proceso de rehidratación. Una vez que están rehidratados se puso en marcha el protocolo de análisis de estos pimientos.
ResponderEliminarEn primer lugar empezamos con la medida del ph realizado mediante el ph-metro con una medición directa a partir del jugo de pimiento, obtuvimos los siguientes resultados después de realizar las siguientes tres medidas nos quedamos con la más representativa siendo “5,2”, observando que tiene un valor muy parecido a la otra variedad con el pimiento rojo.
En segundo lugar, realizamos una valoración del contenido de ácido de azúcares solubles (BRIX) medido directamente del refractómetro dando como resultado 9,5º BRIX volviendo a observar que es muy similar a la otra variedad de pimiento pero con el pimiento rojo.
En tercer lugar, seguimos con la determinación del contenido de ácido ascórbico ( vitamina C). Para ello tenemos que realizar una reacción específica para cuantificarla , entonces usaremos un disolución de almidón al 95% al que echamos 1ml de extracto de tampón. A continuación se va echando lugol hasta que esta disolución cambia de color y los resultados fueron que la media de lugol fueron 130 microlitros. A partir de aquí y mediante la fórmula empleada para la otra variedad da como resultado una cantidad de vitamina C de 1,36 micromoles por mililitro. Comparando estos resultados con los resultados de la otra variedad observamos que la variedad Alegría Riojana tiene menor cantidad de vitamina C.
En cuarto lugar, procedemos a valorar el contenido proteico de la variedad Alegría Riojana mediante el método de Bradford obteniendo un resultado media de 0,261 , con ayuda de la fórmula que utilizamos para la otra variedad de pimiento, obtenemos una cantidad de proteínas de 3,63 microgramos, valor muy cercano a los de la otra variedad al principio, pero cuando la otra variedad la dejamos madurar observábamos que el pimiento rojo presentaba un aumento de casi el doble en su contenido proteico, pero el verde presentaba una disminución del mismo asemejándose a el valor de la variedad Alegría Riojana.
Para finalizar el análisis de esta variedad de pimientos, realizaremos una valoración de los pigmento, recordando que esta variedad se dejó secar, su color es completamente rojo por lo tanto es posible que nos salga 0 en cuanto a su clorofila se refiere al igual que pasaba con la otra variedad de pimiento rojo. Para ello utilizamos el método de Pompelli, para calcular los valores, utilizaremos la misma fórmula que para la otra variedad, como era de esperar esta variedad alegría riojana, al ser de color rojo nos da como resultado que no presenta clorofilas ni a ni b, resultado igual que el pimiento rojo de la otra variedad, pero los carotenoides totales obtenemos un resultado medio de 1,98 microgramo por mililitro, valor más bajo que la otra variedad de pimiento.
En conclusión esta variedad de pimiento, Alegría Riojana es muy similar en el ph, en el contenido de azúcares y en el contenido proteico, pero se diferencia en la cantidad de vitamina C y en el análisis de la valoración de pigmentos.
Un saludo, Antonio Encinas.
Durante esta última semana hemos estado analizando la variedad de pimientos Alegría Riojana. Esta, a diferencia de la variedad California, tiene mayores valores de capsaicina (la cual la podemos encontrar principalmente en las semillas) por tanto es más picante. Es por esto que usamos guantes y gafas durante la manipulación de este fruto.
ResponderEliminarLo primero a tener en cuenta es que estos pimientos se encontraban secos y para trabajar con ellos hubo que rehidratarlos. Para esto consideraremos que la relación es 16% pimiento y 86% agua y por ello pesamos 6 '4 gramos del fruto y más tarde le añadimos 33' 6 mL de agua destilada. Después de esto lo intodujimos todo en un tubo falcon y lo dejamos reposando en el frigorífico durante un par de días. Una vez que los sacamos empezamos con todo el proceso para extraer datos bioquímicos de esta variedad y fue entonces cuando observamos que las muestras después de añadirles agua destilada, tenían mayor espesor que las muestras de pimientos de variedad California.
Conforme vamos extrayendo datos vamos comparando con los resultados obtenidos del análisis de la variedad California.
El pH en esta variedad es de 5 '17 y en la otra con la que trabajamos era de 5’1 por lo cual no notamos mucha diferencia.
Observamos un descenso en los resultados de la valoración Brix siendo ahora de un 9 '5 y antes de un 10, cosa que era de esperar debido a sus altos niveles de capsaicina.
Respecto a los valores ácido ascórbico (de vitamina C) que hemos obtenido mediante el método del lugol, igual que la vez pasada, podemos observar un importante descenso siendo ahora de un 1 '36 y anteriormente de un 6' 075.
Observamos también un cambio en la cantidad de proteínas. Aquí nos encontramos enfrentando los 0 '2605 de media que nos salen en la variedad Alegría Riojana con los 0’450 de la variedad California.
En la determinación de pigmentos sabemos que midiendolos a 470 mn hemos obtenido una media de 0’415 pero en el momento en el que hemos subido a 649 nm o 664 nm ya nos hemos encontrado con unos resultados que, a primera vista pueden parecer incorrectos: 0. La explicación de esto es que un pimiento, al terminar su maduración al completo, es decir, adquirir ese color rojo,va destruyendo clorofilas que lo componen a la vez que va sintetizando carotenos.
A la hora de la medición de pigmentos ha sido un poco más complicado ya que hemos tenido que diluir la mezcla por lo que los resultados habría que multiplicarlos x16 para obtener el número real.
Podemos observar que la presencia de la capsaicina en los frutos hace que los resultados de los diferentes valores bioquímicos de los pimientos puedan variar notablemente e incluso, en la mayoría de los casos, reducirlos bastante según si presentan más.
Hola profe, soy Julia.
ResponderEliminarLo que hemos ido realizando en las sesiones anteriores ha sido estudiar los parámetros bioquímicos de los pimientos picantes. Para ello hay que volver a hidratar los pimientos, que al saber que tiene 16% de pimiento y 84% de agua, deberá de echarse 33,6 mL. También sacamos los bloques de parafina.
En la siguiente sesión, en resumen, machacamos la masa de pimiento y la echamos en una jeringa para sacar el jugo. Luego medimos con un pHmetro para medir el pH, que salen como resultado 5,2; 5,1; 5,2. Más tarde medimos el contenido en azúcar, que salió 9,5 y la vitamina C. También preparamos 0,5 g de almidón con 100 mL de agua para añadirlo a 0,5 g de pimiento y 10 mL de agua.
Según todas las mediciones y resultados obtenidos podemos analizar los siguientes:
- Medida del pH: esta es medida con el pHmetro y salen como resultados 5,2; 5,1; 5,2.
Los valores promedios más comunes del pH de los pimientos son entre 5,3 y 6,3; por lo tanto se acercan bastante aún después de haber tenido tantos cambios como de sequedad, de temperatura… El pH aumenta según maduran los pimientos.
- Determinación de ácido ascórbico (vitamina C): según las medidas del volumen de Lugol, hemos obtenido 130 ul, 140 ul, 120 ul, 130 ul y 130 ul. La media de todas estas medidas es 130 ul. Usando la fórmula para calcular la cantidad de vitamina C, saldría 130/95,479=1,36 mL de vitamina C.
Para conseguir la vitamina C habrá que mezclar una disolución de almidón y lugol, en este caso mezclamos 0,5 g de almidón y 100mL de agua destilada para juntarlo con 0,5 g de pimiento y 10 mL de agua destilada.
La vitamina C aumenta durante la maduración del pimiento y la pérdida de esta vitamina es poco considerable si metemos los pimientos a temperaturas más bajas. Algunas veces la cantidad de vitamina C está relacionada con el tamaño del pimiento.
Según los resultados, que son muy semejantes entre sí, las medidas que hemos obtenido han sido esas, ya que hemos echado cantidades de manera equilibrada tanto de lugol como de almidón, para que posteriormente nos salga un tono azul oscuro, que es el color correcto para los resultados de vitamina C.
Comparando estos resultados con las sesiones del 22 de marzo, comprobamos que han reducido bastante su número, esto es debido a que hemos perdido maduración.
- Determinación de proteínas (Bradford): Hemos hecho 4 medidas, que salen: 0,227; 0,254; 0,291 y 0,27. La media de estas es 0,261. Para saber la cantidad de proteínas hay que hacer la siguiente ecuación:
x= (y - 0,0281)/0,0642
Medida 1: (0,277- 0,0281)/0,0642= 3,88 µg
Medida 2: (0,254- 0,0281)/0,0642= 3,52 µg
Medida 3: (0,291- 0,0281)/0,0642= 4,09 µg
Medida 4: (0,27- 0,0281)/0,0642= 3,77 µg
Los resultados están más o menos igual que el de las sesiones anteriores, menos en los pimientos rojos que ha decrecido y esto puede ser debido a que no se están madurando tanto.
-Pigmentos: Para esto hemos mezclado los 0,5 g de pasta de pimiento con los 10 mL de etanol en un bol limpio. Hemos calculado tres medidas en distintas ondas específicas, que son 470nm, 649 nm y 664 nm. Como resultados han salido de 470 nm: 0,393; 0,444 y 0,408. Las demás han salido 0. Haciendo los cálculos con las fórmulas, sale:
Clorofila a= 13,36 x 0 - 5,19 x 0= 0
Esto se repetirá tres veces, ya que hay tres medidas, pero en este caso como dan a 0 sale lo mismo para todas.
Clorofila b= 27,43 x 0 - 8,12 x 0= 0 Pasa lo mismo que la anterior.
Medida 1: Carotenoides totales= ((1000 x 0,393 - 2,13 x 0 - 97,64 x 0)) / 209= 1,88
Medida 2: Carotenoides totales= ((1000 x 0,444 - 2,13 x 0 - 97,64 x 0)) / 209= 2,12
Medida 3: Carotenoides totales= ((1000 x 0,408 - 2,13 x 0 - 97,64 x 0)) / 209= 1,95
En comparación con los resultados de las sesiones anteriores, en general han disminuido. Esto puede ser debido a que ha disminuido la maduración del pimiento. Por lo que los colores de estos pimientos cada vez están menos saturados.
Buenos días soy Rosalia, Durante esta sesión hemos trabajado con la variedad de pimiento Alegría Riojana. Esta variedad es rica en capsaicina, lo que la hace picante y por esto debemos tener cuidado al manipularla, usando proteccionds. Después de rehidratarlos, empezamos el protocolo de análisis de estos pimientos.
ResponderEliminarAclarar, que hemos obtenido los resultados reflejados en las tablas a partir de las determinaciones bioquímicas que hemos hecho con los pimientos secos que se rehidrataron y se mantuvieron en el frigorífico durante 48 horas antes de preparar los extractos. Así como destacar que se utilizó una dilución de 1/16 para obtener una medición precisa de los pigmentos. Además, preparamos los extractos con 0,5g de pimientos rehidratados en 10 ml de etanol 96º.
Primero, hemos medido el pH. Siendo la MEDIA PH: 5,2
Podemos observar que este valor es muy similar al de la otra variedad con el pimiento rojo.
Después, hemos determinado lavitamina C. Para ello, hemos usado el método del lugol. Hemos hecho la media y empleado la fórmula como con la otra variedad de pimiento: MEDIA vol.lugol: 130 por lo tanto CANTIDAD DE VITAMINA C: 130/95,479=1,36 micromoles por mililitro. Al comparar estos resultados con los de la otra variedad, podemos ver que la variedad Alegría Riojana tiene menor cantidad de vitamina C.
Para las proteínas usamos el método de Bradford, y tuvimos una MEDIA PROTEÍNAS: 0,26. Si comparamos con la variedad dulce, esta picante se asemeja al tipo verde pero varía respecto a la roja.
Respecto a la valoración de los pigmentos: MEDIA PIGMENTOS(470nm): 0,415. Esta es similar a la de los pimientos rojos, ya que las clorofilas=0 debido a ladegradación de cloroplastos. De hecho, por esto los carotenos tienen valores bastante altos.
Saludos.
En estas sesiones nos basamos en la hidratación de los pimientos riojana secos.
ResponderEliminarPara empezar, abrimos estos y los troceamos sin semilla hasta llegar, en nuestro caso, a 6,4g. Seguidamente añadimos 33,6 mL de agua destilada.
Una vez hecho, trituramos con un mortero las muestras hidratadas. Cuando hayamos machacado lo máximo posible, vamos a verter la masa de pimiento en una jeringa, sacándose así el jugo.
Después preparamos el pHmétro humedeciéndolo para que funcione correctamente y calibrarlo para medir el pH de la nueva muestra.
1. Medida: 5,2 ph
2. Medida: 5,1 ph
3. Medida: 5,2 ph
BRIX: 9,5 brix
VITAMINA C. Método Lugol.
6g de pimiento + 6 mL tampón.
(Esta muestra tiene una masa más espesa que la de los pimientos California)
Pesamos 0’5 g de almidón y añadimos 100mL de agua destilada para luego juntarlos con otros 0’5 g de pimiento y 10 mL de agua.
Tras la centrifugación d los pimientos en los tubos meteremos 2 mL de la disolución en 3 tubos de ensayo. Más tarde añadimos lugol hasta que su color se convierta en azul oscuro.
1,36. Vitamina C
5,17 pH
9,5 Brix
MEDIA: 0,2605
En esta sesión nos hemos dedicado a obtener los resultados de las determinaciones bioquímicas de los pimientos secos de la variedad Alegría Riojana, este pimiento se caracteriza por ser muy picante debido a los altos niveles de capsaicina.
ResponderEliminarLo primero que hicimos fue rehidratar los pimientos, añadiendoles 33,6 ml.
Tras dejarlos reposar fuimos obteniendo resultados sobre las siguientes mediciones:
-Medida del Ph:
Medida 1: 5,1
Medida 2: 5,2
Medida 3: 5,2
Tras estos valores podemos establecer una gran SIMILITUD entre este tipo de pimiento y entre el pimiento rojo, siendo el ph del pimiento rojo 5,1.
-Determinación del contenido de ácido ascórbico (vitamina C)
(usamos la siguiente fórmula: volumen de lugol/95,479)
Medida 1: 1,362
Medida 2: 1,466
Medida 3: 1,257
Medida 4: 1,362
Medida 5: 1,362
Al realizar la media de las cinco medidas obtenemos:1,3618 µM/ml
En comparación con los otros tipos de pimientos obtenemos que la Alegría Riojana tiene una MENOR CANTIDAD de Vitamina C.
-Valoración del contenido de azúcares solubles:
ResponderEliminarTras la medición con el refractómetro obtuvimos un total de 9,5 BRIX una cifra SIMILAR al contenido de azúcares solubles del pimiento rojo, aunque descendió con respecto a la medición anterior.
-Determinación de proteínas:
(usamos la siguiente fórmula: x= (y - 0,0281)/0,0642)
Medida 1: 3,88 µg
Medida 2: 3,52 µg
Medida 3: 4,09 µg
Medida 4: 3,77 µg
Al realizar la media de las cuatro medidas obtenemos: 3,815 µg
Al observar estos resultados nos damos cuenta de que los valores con respecto a la última medición siguen en la misma línea y similares al pimiento verde, en cambio se ha producido un decrecimiento en comparación con los valores del pimiento rojo.
-Pigmentos:
Usando unas fórmulas muy extensas (método Pompelli) para calcular la concentración de los pimientos (clorofila a, clorofila b y carotenoides).
Tras hacer las cuentas obtenemos un valor 0 en las clorofilas, esto significa que conforme el pimiento madura se van degradando las clorofilas, y son los carotenoides los que toman el mando en el color.
En conclusión obtenemos los mismos resultados que el pimiento rojo en cuanto a la clorofila aunque el valor de los carotenos son menores que en los pimientos rojos
Tras finalizar las determinaciones bioquímicas podemos concluir que la Alegría Riojana tiene rasgos similares al pimiento rojo.