lunes, 22 de abril de 2024

Análisis de resultados. Lucía Cardaldas

El pasado 24 de febrero volvimos a hacer mediciones  bioquímicas de los pimientos en sus tres estados madurativos, fresco, senescente y seco.
Comenzando por el ph, debemos saber que cuanto más bajo es el ph de la muestra mayor será su acidez por lo que se encuentra directamente relacionado con el ácido ascórbico, esto explica la ascendencia de la vitamina C y a su vez la descendencia del Ph que observamos en la mayoría de casos con excepción de algunos como el piquillo verde o el alegría riojana rojo, cierto es que esto es observable sobre todo en el cambio entre fresco y senescente en el que su Ph disminuye y la vit C aumenta.
La disminución de Ph es apreciable en el tipo melchor verde, melchor rojo,y piquillo verde, aunque en este último la vit C no aumenta.
Cierto es que en muchos casos la disminución de los valores es muy pequeña.
Observando los resultados de una forma más precisa podemos llegar a la conclusión de que en el tipo Melchor Verde sí se aprecia una disminución del ph del fresco a senescente, a la vez que un aumento en la vitamina C; si además lo relacionamos con los azúcares estos deberían de aumentar conforme baja la acidez, ya que cuando una fruta o verdura madura se vuelve más dulce y por tanto menos ácido, esto en este pimiento no lo podemos relacionar con los 3 factores ya que hay un aumento de azúcares a la vez que de vitamina C.
En el caso del Melchor rojo el Ph disminuye, la vitamina C aumenta y los azúcares solubles aumentan, si tenemos en cuenta que los pimientos cuando maduran pierden agua es totalmente comprensible que los valores de brix aumenten ya que al perder agua se encuentran más concentrados. Hay muchísimos factores que influyen en que no todos los pimientos y sus variedades se comporten de la misma manera y esto es muy importante tenerlo en cuenta, uno de ellos podría ser su fisiología, no todos tienen la placenta del mismo grosor por lo que no todos perderán la misma cantidad de agua.
Algunas frutas comienzan a disminuir su pH en respuesta al aumento de madurez. El pH indica la concentración de iones de hidrógeno presentes en determinadas disoluciones. Cuando el pimiento  se va deteriorando y madurando al tenerlo almacenado, observamos cómo se arruga lo que se puede deber a una pérdida de agua, si pierden agua pierden hidrógeno y esta puede ser una de las razones por las cuales el Ph de los pimientos disminuye cuando maduran.
Haciendo una visión más general habiendo hablado ya sobre los de tipo melchor, he observado que coincide en que los que son verdes como el melchor verde y el piquillo verde su Ph disminuye de fresco a senescente, pero en cambio en los rojos sucede justo al contrario, buscando una respuesta razonable frente a esta posible controversia, encontramos lo ya nombrado anteriormente, la maduración, este proceso es la clave de todo, el rojo es más maduro que el verde, y por ejemplo, el alegría riojana tiene una cutícula más gruesa y mantiene más la forma al envejecer, a ello puede deberse esa diferencia entre rojo y verde.
Por otro lado la Vitamina C es un parámetro un tanto complicado,tenemos dos posibles razonamientos frente a su variación, el primero es que cuando madura una fruta o verdura estas suelen perder acidez y volverse más dulces, por lo que su vitamina C debería disminuir conforme envejece, pero otro es la pérdida de agua, sus valores de azúcar, vitaminas, proteínas puede variar, la vitamina C es hidrosoluble por lo tanto al perder agua disminuirán los valores de esta, encuentro completamente lógicos ambos razonamientos, pero debemos añadir el dato de que cuando el Ph disminuye el ácido aumenta y como hemos dicho antes el Ph puede disminuir cuando el pimiento madura, así que todo se vuelve mucho más complejo si relacionamos todos los factores.
  En el caso de la variedad Melchor hay un aumento de fresco a senescente y una disminución considerable del senescente al seco, causada seguramente por la gran pérdida de agua que sufre el pimiento al secarse; en la variedad alegría riojana hay un descenso notable conforme madura el pimiento de los valores de ácido ascórbico, completamente relacionados con la pérdida de agua en la maduración; y por último en el piquillo, en el verde disminuyen una vez más los valores y en el rojo aumentan cuando es senescente, pero disminuye cuando está seco.


Los valores de brix como ya he comentado se pueden relacionar con el Ph y con la vitamina C también, generalmente cuando la fruta o verdura madura se vuelve más dulce y con ello valores más altos de azúcares, pero teniendo en cuenta que el azúcar es soluble y el pimiento pierde agua cuando madura también es normal que bajaran los niveles por esa pérdida de agua.  En una vista más general, en la mayoría de casos los valores de azúcar aumentan, pero aumentan más del fresco al senescente y luego disminuyen con respecto al senescente un poco en la mayoría de casos, esto puede ser porque del fresco al senescente el pimiento está madurando y no está perdiendo tanta agua, pero del senescente al seco lo que está haciendo es arrugarse y perder mucha agua y con ese agua también azúcares.
 

En el análisis de proteínas observamos menos en el melchor verde  y en el piquillo verde, que de fresco a senescente las proteínas aumentan, en todos coinciden que son rojos, por lo que ahí debe estar la respuesta de este aumento, los verdes cuando fueron arrancados de la planta aún no habían acabado de madurar y por lo tanto tampoco de producir todas sus sustancias necesarias para madurar porque aún estaban verdes, pero en cambio, los rojos ya estaban maduros y ellos mismos son los que son capaces de producir más proteínas cuando maduran, los verdes no lo son.
Ahora bien, si nos fijamos en la variación de senescente a seco hay más variedad, puede ser por la pérdida de agua. El melchor verde disminuye con respecto a cuando es senescente y cuando es fresco al igual que en el rojo; el alegría riojana rojo aumenta con respecto a los dos estados anteriores ( recordemos que la cutícula de este es más gruesa y pierde menos agua) y en el piquillo, en el verde hay un aumento y en el rojo disminución con respecto a senescente y aumento con respecto a fresco, debido a que cuando ha madurado ha fabricado más proteínas pero al perder agua al secarse algunas se han ido con ese agua.


Trataremos ahora los pigmentos:
- En la variedad California ( creo que ha habido una confusión y es melchor), en el verde hay una disminución de la clorofila A y B conforme va envejeciendo y secándose, el pimiento verde conforme envejece se pone de color rojo por ello bajan las clorofilas que son las responsables de ese tono verde y poco a poco aumentan los carotenos que son las que dan el color rojo.
En el rojo la clorofila A y B en fresco y senescente es nula y en el seco tenemos pero bastante bajas y los carotenos aumentan notablemente conforme va madurando
-En la variedad de alegría riojana, en el verde no tenemos valores cuando el pimiento envejece en ninguno de los casos pero podemos observar que los valores de carotenos son más bajos que los de clorofilas, totalmente razonable al tratarse de un pimiento verde. Y en el rojo, los carotenos son muy elevados, de hecho, cada vez más debido a esa maduración del pimiento y en comparación con las clorofilas hay muchísima diferencia, las clorofilas en el seco son 0, no hay.
-En la variedad piquillo vemos de nuevo como en el verde las clorofilas aumentan notablemente y los carotenos aumentan aunque se produzca una disminución del viejo al seco que puede deberse a la pérdida de agua. El rojo también tiene valores razonables siendo las clorofilas bastante bajas, cada vez más conforme pasa el tiempo y los carotenos justo al contrario cada vez más altos.
 

Se ha añadido al final los datos de una variedad de pimiento nueva, el pimiento italiano, que se hizo en proyectos anteriores, datos que nos ayudan a ampliar nuestros conocimientos y a tener más fundamentos para los razonamientos ya hechos. Lo cierto es que estos datos son totalmente razonables, sus clorofilas disminuyen conforme envejece y sus carotenos aumentan, las proteínas aumentan al envejecer, lo que podría ser porque es rojo o porque la pérdida de agua ha hecho que se encuentren más concentradas estas proteínas. La vitamina C disminuye comprensible al estar madurando el pimiento,  su Ph se mantiene constante y  por último los azúcares disminuyen seguramente por esa pérdida de agua, aunque cierto es que no hay demasiada diferencia.

Valoración de resultados. Candela Torres Gurrea

1. Valoración del pH de los extractos de pimientos 

En el caso de las variedades de pimiento de Melchor verde, Melchor rojo, Alegría riojana verde y Piquillo verde, la disminución de pH se debe a la pérdida de agua durante la maduración. Al perder agua durante la maduración, también pierde hidrógeno, y el pH indica la concentración de iones de hidrógeno presentes en determinadas disoluciones. Es por esto que al disminuir la cantidad de hidrógeno, también disminuye el pH, y el pimiento se vuelve más ácido.

En el caso de la variedad de alegría riojana rojo, el aumento del pH, se debe a la disminución del ácido ascórbico o Vitamina C. Al disminuir la cantidad de vitamina C, el pimiento se vuelve menos ácido, es decir, se vuelve más base. Esto provoca un aumento del pH, ya que cuanto más base es una sustancia mayor es su pH y viceversa.
 
Y por último, en el caso de la variedad de pimiento de piquillo rojo, podemos observar que en primer lugar el pH aumenta y que después disminuye. Sin embargo, la variación es casi insignificante, y después regresa a los valores iniciales, por lo que esté ligero aumento tal vez puede deberse a modificaciones en los valores de azúcares solubles.

2. Valoración del contenido en azúcares solubles (º Brix)

En este caso, podemos observar que en todas las variedades de pimiento, en primer lugar, la cantidad de azúcares solubles aumenta y después disminuye. El aumento, se debe a que la fruta inmadura tiene su energía almacenada en modo de almidón, del que se va liberando azúcar a medida que avanza la maduración, debido al proceso de hidrólisis, por el que el almidón se rompe en azúcares simples como sacarosa, fructosa o glucosa, es por esto que cuanto más maduro esté el pimiento más cantidad de azúcar liberará aumentando así  la cantidad de azúcares solubles.

En cambio, cuando se secan, la cantidad de azúcares solubles disminuye, esto puede deberse a la pérdida de agua durante la maduración, que por lo tanto conlleva una pérdida de azúcares que están diluidos en el agua.

3. Valoración del contenido de ácido absorcico.

En el caso de la variedad de alegría riojana rojo y de piquillo verde, podemos observar que se produce una disminución progresiva de la cantidad de Vitamina C. Esto se debe a qué con la maduración el pimiento va perdiendo agua, y la vitamina C es una sustancia hidrosoluble, por lo que al disminuir la cantidad de agua también disminuye la cantidad de vitamina C.Además, conforme el pimiento va madurando, como hemos observado anteriormente, aumenta la cantidad de azúcares solubles, volviendo a los pimientos menos ácidos, y por lo tanto disminuyendo la cantidad de vitamina C.

En cambio, en el resto de variedades, podemos observar que primero se produce un aumento y luego disminuye. Ese aumento inicial puede deberse a la disminución del pH, ya que cuanto más bajo es el pH de una sustancia, más ácida es esta, y por lo tanto mayor es la cantidad de vitamina C o ácido ascórbico. Y  la posterior disminución, puede deberse al igual que en las variedades anteriores a la pérdida de agua durante la maduración del pimiento.

4. Análisis de las proteínas

En el caso de las variedades de pimientos verdes, podemos observar una disminución en el contenido proteico tras la maduración.Esto puede deberse  a que una vez que el pimiento verde se vuelve rojo, es decir, una vez que ha eliminado por completo los cloroplastos, este deja de llevar a cabo la fotosíntesis, por lo que también deja de elaborar todas las enzimas proteicas que elabora  en la fotosíntesis, reduciéndose así el contenido proteico.

En cambio, en el caso de las variedades de pimiento rojo, podemos observar un aumento del contenido proteico cuando pasan de fresco a senescente. Esto probablemente se deba a la pérdida de agua en el proceso de maduración ya que esta clase de pimiento ya había eliminado los cloroplastos antes de ser recogidos, por lo que las enzimas proteicas no se degradan, y al disminuir la cantidad de agua aumenta la concentración de las mismas en el pimiento. Y por último, cuando pasan de senescentes a secos, podemos observar una disminución, la cual puede deberse a una pérdida excesiva de agua durante la maduración.

5. Valoración de pigmentos Fotosintético
En cuanto a la clorofila tanto a como b, podemos observar claras diferencias entre la variedades verdes y rojas. En el caso de la variedades verdes, podemos observar una disminución de la cantidad de clorofila durante la maduración. Estas variedades, a diferencia de las rojas, si conservan las clorofilas al arrancarlas de la mata, ya que no les ha dado tiempo a eliminarlas ni de cambiar de color, y su disminución, se debe a la pérdida dd agua durante la maduración.

En cuanto a las variedades rojas, podemos observar, que en un principio sus valores de clorofila tanto a como b son cero, ya que la elimina durante la fotosíntesis al cambiar de color. En cambio, podemos observar un ascenso de los valores cuando pasan a secos, lo cual puede deberse a la pérdida de agua durante la maduración, ya que al perder agua la poca cantidad de clorofilas que conserva el pimiento aumenta su concentración.

Y por último, en los carotenos podemos observar un aumento en ambas variedades, aunque en el caso de los rojos es mucho mayor que en el de los verdes. En la variedades verdes, esto se debe a que los carotenoides son compuestos responsables de la coloración roja de gran número de alimentos, es por esto que como los pimientos verdes aún están madurando y se están poniendo rojos su nivel de carotenoides es cada vez mayor. Y por otro lado, en la variedades rojas este masivo aumento de carotenos se debe probablemente a la pérdida de agua durante la maduración, ya que al disminuir estos valores aumenta la concentración de carotenos y por lo tanto su cantidad.

Valoración de resultados. Informe de Álvaro Molina Ruiz

Antes de comenzar con la valoración general de los resultados hay que aclarar lo que es un pimiento en estado senescente y cuantos pimientos han sido evaluados en el proyecto.
Entre los cuatro tipos de pimientos que hemos valorado se encuentran el California Melchor (tanto el verde como el rojo), el Alegría Riojana (también verde y rojo), el Piquillo verde y el rojo, y también se añade el Dulce Italiano. Todos estos pimientos han sido estudiados en estado fresco, senescente y seco, para así poder obtener todas las conclusiones que nos han sido necesarias. El estado senescente en este proyecto ha significado que el pimiento estaba al aire libre sufriendo maduración, deterioro, y envejecimiento en general. Y el estado seco, como su nombre indica, es cuando el pimiento se hallaba totalmente sin agua producto de estar expuesto al aire libre.
Una vez aclarado esto, comienzo con la valoración de los resultados.
-Valoración del pH:
En lo que respecta al pH los pimientos han tenido subidas y bajadas de este, pero también hay alguno en que los valores se han mantenido. Si nos fijamos en los seis pimientos, se confirma que todos los pimientos sufren una clara bajada de su valor del pH de estado fresco a senescente y luego a seco, todos excepto el Alegría Riojana Rojo y el Piquillo Rojo (en el caso del Alegría Riojana Verde no se tienen resultados).
En el caso del primero, lo que ocurre es que en la transición del estado fresco al senescente y la del senescente al seco el valor de pH sube un una pequeña cifra (0,2 y 0,1).
Por su parte, en el Piquillo Rojo se produce una subida del estado fresco al senescente pero una bajada del senescente al seco, y lo curioso aquí es que sube 0,3 y baja después 0,3, asique el pimiento acaba con el mismo pH en estado seco que en fresco, y con 0,3 más en el senescente.
Lo más normal es que en esta transición de estado se pierda pH, pero si nos fijamos en los pimientos verdes, todos han tenido una bajada de pH, hasta aquí normal, pero los pimientos rojos aumentan su pH y también lo reducen, en el caso del Melchor se reduce, pero en los otros dos rojos no.
Lo más lógico es que esto se debiese a que los pimientos verdes maduraron y los rojos no, pero esto solo justifica que los verdes hayan bajado y dos rojos no, por lo que queda por explicar porque el Melchor Rojo ha bajado su pH en vez de subirlo.

Hay varias explicaciones que podrían ser certeras, pero la que cobra más fuerza a mi parecer es que el Melchor a perdido pH porque su pH inicial era mucho mayor (0,7 más) que el de los otros dos pimientos rojos.
Teniendo en cuenta que un el valor de pH normal en los pimientos rojos (en general) oscila entre 4.5 y 5.5, lo más probable es que estos pimientos hayan perdido o ganado pH para situarse en la franja de pH más propia de cada tipo de pimiento, es por esto que el Melchor pierde pero los otros dos suben y se mantienen.
En conclusión, los pimientos verdes han disminuido su pH porque han madurado, y los pimientos rojos han bajado, subido, o mantenido su pH debido al valor normal propio de cada tipo de pimiento.
A parte de estos seis pimientos también se añade el Dulce Italiano en estado fresco y en senescente. En este caso el ph se mantiene igual, por lo que lo más probable es que ese pH sea el más adecuado a su tipo, y por esto no ha perdido pH en la transición de estado.

-Azúcares solubles (Brix):
Las cantidades de Brix en todos los pimientos, excepto en el Dulce Italiano y el Alegría Riojana Verde, el Brix sube de estado fresco a senescente y luego baja de senescente a seco. La única diferencia es que en el Melchor Verde, Piquillo Verde y Piquillo Rojo el pH final es mayor que el inicial, y en el resto es al contrario. La explicación más probable bajo mi razonamiento es que cada pimiento a perdido agua en una cantidad distinta, y por tanto los azúcares solubles son especialmente distintos en cada pimiento, evitando así que haya habido relación entre los pimientos rojo, entre los verde, o entre los tipos específicos (Melchor, Piquillo, ect).

-Ácido ascórbico (conocido como vitamina C):
En el caso del ácido ascórbico nos topamos con que tres pimientos suben la cantidad de Vitamina C en la primera transición y después disminuye su cantidad de esta en la transición de senescente a seco, y terminan con menos vitamina C que al principio.
Sin embargo, otros tres pimientos experimentan una bajada de Ácido ascórbico en las dos transiciones, y también quedan con menos vitamina C al final que al principio.

Puesto que todos los pimientos sin excepción alguna quedan con menos vitamina C en estado seco (al final) podemos deducir que todos estos han perdido de igual forma (que no cantidad) en última instancia, probablemente debido a que se han secado simplemente. La única diferencia es que tres pimientos han perdido en ambas transiciones.
La explicación que yo veo más coherente es que, teniendo en cuenta que la pérdida de Vitamina C se produce por la exposición al aire; la luz; a estar mucho tiempo almacenados y otros, a cada tipo de pimiento le a afectado en una medida distinta la exposición a todos estos factores y las transiciones de estado, y por eso han perdido en diferente medida, acorde a su tipo y a su color (en el piquillo el verde sí ha bajado su valor en ambas transiciones pero el rojo no).

-Proteínas:
Respecto a este valor ha habido toda clase de cambios en los pimientos. Desde subidas de las proteínas entre la primera y segunda transición, hasta bajadas de pimientos en las dos transiciones (y muchos más casos específicos).

Teniendo en cuenta que no se repite casi ningún caso en estos seis pimientos (solo 1 se repite) y que lo normal cuando se exponen los pimientos al aire es que pierdan proteínas (ya que una vez cosechados los pimientos ya no producen proteínas), la explicación más lógica es que las muestras de los pimientos en cuanto proteínas se refiere han sido diferentes producto del azar de las mismas, es decir, ya que los casos de oscilación de los valores son muy diferentes y fuera de lo común, lo que es más probable es que las muestras han estado influidas por el azar en cuanto a la cantidad de proteínas que llevaban cada una. Si esta no fuera la explicación, pudiera ser que cada pimiento tenga su variación de proteínas específica.

-Pigmentos fotosintéticos (clorofilas a y b, carotenos):
 
·Clorofila a:
Puesto que la clorofila a es la que el pigmento que da el color verde, y debido a otros factores más, la clorofila a es normalmente baja en pimientos rojos. Exceptuando algún caso (uno de ellos ahora lo trataremos) todos los pimientos terminan con menos clorofila a que al inicio, y puesto que es lo normal cuando los pimientos maduran y/o se exponen al aire, esto queda como algo propio y común.

El único caso (exceptuando un pimiento en el que sube la clorofila y luego baja) que termina con más clorofila a que al principio es el Melchor Rojo, que a pesar de tener 0 en estado fresco y senescente, no lo tiene en estado seco.

No he encontrado una explicación para este extraño suceso, solo nos podemos quedar con que esto no es lo común, y menos en un pimiento rojo. En resumen, todos los pimientos han perdido clorofila a al final, excepto el Melchor Rojo.

·Clorofila b:
En lo que respecta a esta clorofila ocurre prácticamente lo mismo que con la clorofila anterior; todos lo pimientos (excepto el Melchor Rojo) terminan con menos clorofila que al principio. Como esta clorofila también es común que baje en el proceso realizado, la conclusión es la misma que con la anterior clorofila.

·Carotenos:
Los valores de los carotenos se asemejan en todos los pimientos. Lo que quiero decir con esto es que en TODOS los pimientos han subido los carotenos y han acabado en estado seco con más carotenos que en el fresco.

Lo normal es que en un pimiento rojo suban los carotenos, ya que es lo común en la maduración y en los pimientos rojos en general. Contando con esto, el resultado es coherente y tiene sentido, ya que ha ocurrido lo más normal, que suban los carotenos y bajen las clorofilas (exceptuando al Melchor rojo en lo que a las clorofilas se refiere).

CONCLUSIÓN:
Para cerrar esta valoración decir que los resultados han sido muy variados y que hay muchos fuero de lo común y muchos otros dentro de lo normal. También decir que mis razonamientos no tienen porque ser la respuesta correcta a los resultados y que hay muchos factores y diferentes causas de los resultados.

Valoración de resultados. Informe de Lucía Muñoz González

A finales del primer trimestre retomamos nuestro proyecto y, una vez más, lo que empezamos haciendo fue analizar los valores bioquímicos. Esta vez analizaremos los azúcares, el pH, la vitamina C, las proteínas y los pigmentos de las variedades piquillo verde, piquillo rojo y alegría riojana roja (queda pendiente trabajar con los piquillos desecados y la variedad de alegría riojana verde). Para ello preparamos una doble solución con 10 días de diferencia. Una del 13/11/2023 y otra del 23/11/2023. Usamos los métodos pertinentes para obtener los resultados que vemos arriba y una vez recopilados, los analizamos.
Empezaremos por los azúcares solubles (Brix): vemos que conforme ha pasado el tiempo el número de azúcares ha aumentado. Esto indudablemente se debe a la pérdida de agua del pimiento. Al disminuir el agua en el fruto aumenta la concentración de azúcares en el mismo. Lo curioso es que se produce un mayor aumento en las variedades rojas (de 10 a 20 en piquillo y de 11 a 22 en alegría riojana) que en la verde (pasa de 7 a 13’5). Esto podría deberse a que, al haber completado su proceso de maduración en la mata, los niveles de azúcares se hayan formado al completo y estos tengan más azúcar que los verdes. Es más, si comparamos con los resultados obtenidos de la variedad dulce del año pasado (california) veríamos que siguen el mismo patrón que los piquillos.
Prosiguiendo con los valores de pH vemos que aumentan levemente según envejece el pimiento en la variedad alegría riojana (4’8 a 4’96), aumentan un poco más bruscamente en la variedad piquillo roja (4’8 a 5’1) y descienden en la variedad piquillo verde (de 5’4 a 5’03)
La determinaciones de vitamina C las hicimos a 500 microlitros en lugar de a un mililitro por lo que habrá que doblar las medidas reflejadas en la tabla de arriba que se refieren al volumen de lugol. Por lo que deducimos la concentración de vitamina C aplicando la fórmula (v. lugol/95’479):

- Piquillo verde (fresco): 3’69 micromoles/mL.
- Piquillo verde (senescente): 2’44 micromoles/mL
- Piquillo rojo (fresco): 5’17 micromoles/mL
- Piquillo rojo (senescente): 6’076 micromoles/mL
- Alegría Riojana Rojo (fresco): 7’54 micromoles/mL
- Alegría Riojana Rojo (senescente): 3’072 micromoles/mL

Vemos un considerable descenso de vitamina C en los pimientos alegría riojana lo quepodría deberse a una pérdida más notoria de agua en esta variedad respecto al piquillo rojo haciendo así que disminuyesen los valores nutricionales.

En la determinación de proteínas aplicaremos la ecuación (y-0’0281)/ 0’0642 siendo y la media de los valores obtenidos. El resultado lo dividimos entre 5:

- Piquillo verde (fresco): (0’231-0’0281)/ 0’0642 = 0’634μg 
- Piquillo verde (senescente): (0’226-0’0281)/ 0’0642 = 0’6176μg 
- Piquillo rojo (fresco): (0’1167-0’0281)/ 0’0642 = 0’2759μg 
- Piquillo rojo (senescente): (0’2697-0’0281)/ 0’0642 = 0’7526μg 
- Alegría riojana rojo (fresco): (0’1503-0’0281)/ 0’0642 = 0’3806μg 
- Alegría riojana rojo (senescente): (0’244-0’0281)/ 0’0642 = 0’6736μg
 
Vemos que los valores proteicos incrementan notoriamente en los pimientos rojos senescentes esto se debe a que, en el momento que se los arranca de la mata, ya han producido todas las proteínas necesarias y se nota esa diferencia al perder agua y tener igual concentración de proteínas. Para hallar los valores de pigmentos haremos sustituiremos donde ponga A664, A649 y A470 en las siguientes ecuaciones por los respectivos valores obtenidos.

Clorofila a (μg/mL) = 13,36 x A664 - 5,19 x A649

 Clorofila b (μg/mL) = 27,43 x A649 - 8,12 x A664

Carotenoides totales (μg/mL) = [1000 x A470 - 2,13 x (Clorofila a) - 97,64 x (Clorofila b)] /209.

- Piquillo verde fresco:
Clorofila a (μg/mL) = 13,36 x 0’512- 5,19 x 0’289 =53’871 μg/mL
Clorofila b (μg/mL) = 27,43 x 0’289 - 8,12 x 0’512 = 37’7 μg/mL
Carotenoides totales (μg/mL) = [1000 x 0’730- 2,13 x 5’3871 - 97,64 x 3’77] / 209 =-16’1μg/mL= 0

- Piquillo verde senescente
Clorofila a (μg/mL) = 13,36 x 0’013- 5,19 x 0’0347 = 0 μg/mL
Clorofila b (μg/mL) = 27,43 x 0’0347 - 8,12 x 0’013 = 8’46261 μg/mL
Carotenoides totales (μg/mL) = [1000 x 0’0434- 2,13 x (0’00797) - 97,64 x (0’846261)] / 209
= 203’5 = 0 μg/mL
- Piquillo rojo fresco
Clorofila a (μg/mL) = 13,36 x 0’027- 5,19 x 0’028= 4’99μg/mL
Clorofila b (μg/mL) = 27,43 x 0’028- 8,12 x 0’27= 11’53 μg/mL
Carotenoides totales (μg/mL) = [1000 x 0’175- 2,13 x (0’215) - 97,64 x (0’549 )] / 209 =
377’34 μg/mL

- Piquillo rojo senescente
Clorofila a (μg/mL) = 13,36 x 0’01- 5,19 x 0’019= 0’65μg/mL
Clorofila b (μg/mL) = 27,43 x 0’019- 8,12 x 0’01= 4’3997 μg/mL
Carotenoides totales (μg/mL) = [1000 x 0’0745- 2,13 x (0’202) - 97,64 x (0’43997)] / 209 =
354’53 μg/mL

- Alegría riojana roja fresca
Clorofila a (μg/mL) = 13,36 x 0’0183- 5,19 x 0’0213= 1’33 μg/mL
Clorofila b (μg/mL) = 27,43 x 0’019- 8,12 x 0’01= 3’6 μg/mL
Carotenoides totales (μg/mL) = [1000 x A470 - 2,13 x (0’133 ) - 97,64 x (0’436)] / 209 =
239’7μg/mL

- Alegría riojana roja senescente
Clorofila a (μg/mL) = 13,36 x 0’093- 5,19 x 0’059 = 9’4132 μg/mL
Clorofila b (μg/mL) = 27,43 x 0’059- 8,12 x 0’093 = 8’6321 μg/mL
Carotenoides totales (μg/mL) = [1000 x A470 - 2,13 x (1’132 ) - 97,64 x (0’86321)] / 209 =
376’82 = 0μg/mL

El piquillo verde pierde gran parte de sus clorofilas por el avance en su estado de maduración una vez arrancado de la mata. Así lo hace también la variedad alegría riojana que podría justificarse, al igual que con la vitamina C, con su brusca pérdida de agua según sigue madurando fuera de la mata. Al haber menos agua las clorofilas y carotenos van disminuyendo. El piquillo rojo aumenta sus valores lo que podría deberse a su maduración.
Los valores de carotenos son normales ya que los pimientos al ir madurando van tiñéndose cada vez de un tono más rojo.
Sería interesante haber analizado la pérdida de agua tanto de la alegría riojana como de los piquillos para así poder saber a que se deben esos picos de diferencia entre unos y otros.

Valoración global de los resultados: Informe de Javier Balderas

El pasado 23 de febrero concluimos los experimentos bioquímicos de nuestros pimientos. A lo largo del pasado curso y estos meses atrás, hemos completado y recogido los datos del análisis bioquímico de las variedades: California Melchor, Alegría Riojana y Piquillo. De estas tres variedades diferenciamos, según el grado de maduración, en frescos, senescentes (analizados doce días después de recibirlos y almacenados a To ambiente) y secos.

Recalcamos la ausencia de valores en los pimientos alegría riojana, tanto senescentes como desecados. Ahora es el momento de analizar todos los resultados de nuestras determinaciones (Brix, pH, proteínas, vitamina C y pigmentos fotosintéticos), en todos y cada uno de las variedades comentadas anteriormente, en función tanto de si es verde o rojo, como su estado de maduración (fresco, senescente y seco). Destacamos que durante esta interpretación nombraremos ciertos estudios (nombrados entre corchetes) que nos apoyaran, a la hora de analizar las variaciones en ciertas determinaciones. 

En primer lugar, a excepción del alegría riojana rojo y el piquillo rojo (el cual aumenta su pH y una vez seco vuelve a bajar), en los pimientos aumenta su pH conforme van desecándose, esto se debe principalmente a la pérdida de agua.

Para relacionar la diferencia de aumentos y disminuciones, destacamos un estudio (Salisbuty y Ross, 1994) el cual afirma que la disminución o aumento en pH de los frutos, se puede atribuir al menor o mayor contenido de ácidos orgánicos (ej: ác. málico, ác oxálico y ác. cítrico, entre otros) presentes de forma ionizada en el tejido vegetal.
Finalmente destacamos el pH casi neutro de la variedad alegría riojana verde.
 
 
En este apartado vemos un patrón en todos nuestros pimientos, los azúcares solubles (o Brix) aumentan desde el estado fresco hasta el senescente. Sin embargo, disminuye en el estado seco. Destacamos el gran contenido de azúcares en estado senescente tanto de la alegría riojana como de ambos piquillos.
Ese aumento que observamos se puede deber a que, al envejecer el pimiento, estos empiezan a tener un menor contenido de agua, a causa de su pérdida, por lo que el valor de o Brix, será mayor. La disminución que observamos de senescente a seco, puede estar causada porque una vez separado el fruto, de la planta, el contenido de azúcares solubles aumenta para después ir disminuyendo.

 
Esta tercera valoración nos ocupa el contenido de vitamina C. Cómo se observa en la gráfica, tanto para el piquillo verde como para la alegría riojana, los valores disminuyen al envejecer el pimiento. A diferencia de la variedad california y el piquillo verde, en los que aumentan. En general se observa una disminución drástica una vez secos.
Destacamos valores como los del alegría riojana rojo en el que el contenido de ácido ascórbico en estado fresco, duplica la cantidad en comparación como el estado senescente, sería interesante explicar por qué tan elevada concentración de vitamina C, y si juega algún papel en esto, los altos niveles de capsaicina...
Así como la diferencia tan notable de valores entre el piquillo verde y rojo, ya que mientras el verde disminuye su concentración de vitamina C al madurar, el rojo no solo no se degrada, sino que aumenta.
El aumento de concentración de un estado fresco a senescente, se puede deber a la pérdida de agua, destacamos también que en los pimientos rojos (Chávez et al., 2000), al avanzar la maduración, se producen incrementos en el poder antioxidante de los frutos, así como también en los contenidos de ácido ascórbico (es un antioxidante, considerado capaz de reducir la incidencia de enfermedades degenerativas). Aunque, en el caso de los piquillos, es interesante analizar por qué en una misma variedad, el verde y el rojo tienen comportamientos distintos.
Diferentes factores ambientales como la temperatura afectan a los niveles de ascorbatos durante el proceso de maduración, aunque, en nuestro caso es bastante difícil, pues ambos pimientos han estado en las mismas condiciones, lo que nos lleva a pensar que los pimientos tuviesen distinto grado de maduración o alguna que otra diferencia.
Diversos trabajos revelan el diferente comportamiento en el contenido de este antioxidante durante este proceso fisiológico. Hay estudios en los que se detectan incrementos y otros en los que no se encuentran cambios importantes. Los altos niveles de ascorbato puede deberse a que son mantenidos por la actividad GalLDH, que no sufre variaciones durante la maduración del fruto (Marta Rodriguez, tesis UGR, 2017).

 
En cuanto al análisis de las proteínas en nuestros pimientos observamos como en los frutos rojos (California, Alegría Riojana y Piquillo), al envejecer, se duplican las cantidad de las mismas y, en el caso del piquillo rojo, incluso triplicando la cantidad. Mientras que en los frutos verdes disminuyen ligeramente o se mantienen incluso estables como en el piquillo verde.
Apoyándonos en estudios, destacamos una relación entre los antioxidantes, como la vitamina C, y la degradación de las proteínas. Estos antioxidantes ayudan a prevenir la degradación de biomoléculas como proteínas. De esta forma podemos relacionar algunos datos de ambas determinaciones.
Por otro lado, la disminución de contenido proteico, puede estar debido a la pérdida de cloroplastos (fotosíntesis) y otras enzimas, ya que los pimientos han madurado.
 


 
En este apartado observamos observamos valores coherentes. Existen cambios significativos a nivel de clorofilas observándose los máximos niveles de ellas en los frutos verdes y reduciéndose conforme envejecen hasta hacerse en algunos casos prácticamente inexistentes, como es el caso también de los frutos rojos, aunque con niveles mucho más bajos en comparación a los verdes. Sin embargo, como es normal, los niveles de carotenoides son al revés, a medida que el pimiento madura el nivel aumenta significativamente.
En el caso de los carotenos destacamos los casos del piquillo rojo con un gran contenido en general de carotenos y variaciones muy significativas en la alegría riojana roja que se triplica conforme madura hasta secarse, además del california rojo que en su estado seco presenta seis veces más, contenido en carotenos que en su estado fresco.
De todas formas hay otros valores menos coherentes, puesto que hay algunas variedades en las que las clorofilas aumentan al madurar, seguramente por desecación, pérdida de agua.


 
Vemos, antes de acabar la interpretación de nuestros resultados, una gráfica con todas las determinaciones de una variedad diferente, la dulce italiano, realizados en proyectos anteriores. Con unos valores de pH bastante parejos a las anteriores variedad. Un contenido de azucares solubles mucho menos contraste, a diferencia de los demás frutos. Presenta un contenido de vitamina C más bajo que los demás y su disminución conforme madura es semejante al alegría riojana rojo y al piquillo verde. En cuanto al contenido proteico se asemeja bastante al Melchor rojo. Finalmente, la valoración de los pigmentos fotosintéticos es bastante concordante y visualizamos que en su estado freso tiene valores muy parecidos al alegría riojana verde.

martes, 16 de abril de 2024

Histología de nuestras variedades de pimiento: microscopía confocal

En la pasada visita a la Estación Experimental del Zaidín conocimos los fundamentos del microscopio confocal y Juan de Dios Alché obtuvo imágenes de pimientos frescos de las variedades California verde y rojo. En este tipo de microscopio observamos cortes frescos que fueron iluminados por luz láser de distintos colores obteniéndose imágenes sorprendentes en las que se muestra la luz que emiten las propias moléculas al ser excitadas por los láseres. Es un microscopio que funciona como un tomógrafo y va obteniendo cortes, que luego son integrados mediante un ordenador para dar imágenes muy vistosas que aportan una gran cantidad de información. A continuación se muestran algunas de las imágenes obtenidas por Juan de Dios Alché.

1. Pimientos de la variedad California verde fresco

Corte de la capa externa del pericarpo de pimiento California verde.

  
Corte de la capa externa del pericarpo de pimiento California verde.
Pimiento California verde, capa externa (proyección).

Semilla de pimiento California verde fresco.


2. Pimientos de la variedad California rojo fresco

Pericarpo de pimiento California rojo fresco. Corte individual.

 

Pericarpo de pimiento California rojo (proyección)

Pericarpo de pimiento California rojo (proyección)

Pericarpo de pimiento California rojo (proyección)
Pericarpo de pimiento California rojo (proyección)

Como podemos ver, las imágenes son completamente distintas a las que hemos obtenido mediante microscopía óptica tradicional. Aparecen colores que se deben a las emisiones de las propias moléculas que componen los pimientos. Y aunque nos quede muchísimo que aprender sobre este tipo de microscopía, sí que ya podemos ir haciendo alguna actividad, como comparar las estructuras en imágenes con ambos tipos de microscopía, identificar algunos orgánulos en estas últimas o plantearnos porqué aparecen manchitas de color rojo en las imágenes de pimientos verdes y de color verde en los pimientos rojos. Como sabéis, los comentarios en el blog.

miércoles, 10 de abril de 2024

Histología de nuestras variedades de pimientos (I): microscopía óptica

El año pasado fuimos conscientes de la poca bibliografía que existe sobre la histología de los frutos de los pimientos. Una parte de nuestro proyecto consistía en llenar este hueco y para ello Juan de Dios Alché y miembros de su equipo procesaron los pimientos y nos facilitaron una gran cantidad de cortes de la carne de los frutos, de la placenta, de las extensiones de la placenta y de las semillas. Hemos tomado imágenes y hemos hecho una serie de composiciones que faciliten su comparación. En algunas de ellas faltan algunas fotos que están pendientes de que confirmemos que realmente corresponden a esas estructuras.

La tarea que tenemos que afrontar es la comparación de las distintas estructuras que valoremos diferencias entre las distintas variedades de pimientos y los distintos estados de cada una de ellas. También es necesario que revisemos la bibliografía de modo que recopilemos trabajos de los que podamos obtener información acerca de estas estructuras.

1. Estructura histológica del pericarpo de pimiento

Cortes observados a 10X

Capas externas del pericarpo de los pimientos (40X)

Capas externas del pericarpo (colénquima) 40X.

Células parenquimáticas del pericarpo de pimiento (40X)


2. Estructura histológica de la placenta de pimiento


Cortes de placenta de las distintas variedades de pimientos (10X)


Cortes de placenta de las distintas variedades de pimientos (40X)  

3. Estructura histológica de las extensiones de la placenta

Cortes de extensión de placenta (10X)


Cortes de extensión de placenta (40X)

4. Estructura histológica de la semillas de pimientos de distintas variedades

Cortes de semillas de las distintas variedades y estados de pimientos (10X)

Cortes de las distintas variedades y estados de pimientos (40X)




Análisis de resultados. Lucía Cardaldas

El pasado 24 de febrero volvimos a hacer mediciones  bioquímicas de los pimientos en sus tres estados madurativos, fresco, senescente y seco...